Een beeldvormingssysteem voor levende cellen kiezen

Kies eerst de workflow voor uw kweekvaten

Voor herhaalde observaties van één beeldveld biedt de digitale tafelmicroscoop één beeldpositie. Voor meerdere velden of wells kiest u een gemotoriseerd systeem met meerdere posities. De compacte imager is verkrijgbaar met verschillende objectief- en fluorescentie-uitvoeringen; bij het systeem met verwisselbare objectieven kunt u wisselen tussen 2×, 4× en 10×. Geen van beide omschrijvingen garandeert dat iedere plaat of houder past.

De systemen voor twee en zes vaten zijn relevant als u onafhankelijke kweken in hetzelfde experiment wilt volgen. De capaciteit hangt af van de houder: geef fabrikant, formaat en afmetingen van het kweekvat door voordat u “twee” of “zes” als bevestigde configuratie beschouwt. Meer posities, z-vlakken en kanalen verlengen ook de acquisitiecyclus. Controleer of het volledige schema binnen uw gewenste tijdsinterval past.

Voor opschaling in meerlaagse kweekvaten neemt de speciale monitor beelden op van de onderste laag van vaten met maximaal tien lagen. Het systeem beeldt niet iedere laag af. Gebruik observaties van de onderste laag als een vastgelegde bemonsteringsstrategie en bepaal of deze representatief zijn voor de rest van de kweek.

Stem beeldveld en fluorescentie af op de uitlezing

Lage vergroting geeft overzicht voor groei en confluentie; hogere vergroting kan kleinere structuren laten zien, maar beslaat minder kweekoppervlak per beeld. Voor de systemen met twee en zes vaten zijn bijvoorbeeld beeldvelden opgegeven van 2,0 × 1,5 mm bij 4× en 0,5 × 0,4 mm bij 20×. Bepaal of representatieve velden voldoende zijn of dat u beelden moet samenvoegen. Alleen de objectiefvergroting bepaalt de optische resolutie niet.

Helderveld kan zonder fluorescentielabel worden gebruikt voor morfologie, confluentie en wondoppervlakte. Fluorescentie voegt een gelabelde uitlezing toe, maar “groen” of “rood” volstaat niet om kleurstofcompatibiliteit vast te stellen. Geef de fluorofoor en excitatie-/emissievereisten door en vergelijk die met de exacte filterset. Compacte en tafeluitvoeringen hebben uitvoeringsafhankelijke kanalen; neem niet aan dat ze dezelfde tweekanaalsconfiguratie hebben als de grotere systemen.

Beoordeel bij een lang experiment belichting, acquisitie-interval en scherpstelling op de werkelijke cellen. Een softwarefunctie zoals autofocus, stitching of celtelling vraagt om controle met uw eigen monster. Een fluorescentietelling uit beelden is bovendien een andere meting dan de concentratie van een suspensie in een telkamer.

Controleer de volledige installatie in de incubator

Meet de bruikbare breedte, diepte en hoogte van het schap, de deuropening en de kabeldoorvoer. Neem ook de houder, het gevulde vat en kabelbochten mee, niet alleen de instrumentbehuizing. De opgegeven aanbeveling van een incubator boven 170 L voor het tweevatensysteem of boven 230 L voor het zesvatensysteem is slechts een eerste controle; de werkelijk beschikbare ruimte moet nog steeds worden beoordeeld.

Controleer gebruiksomgeving, reinigingsmethode, externe computer en gegevensexport voor de gekozen uitvoering. Vraag een voorbeeldbeeld en geëxporteerd resultaat dat bij uw assay past. Leg vóór bestelling vast welke houder, objectieven, fluorescentie-opties, softwarefuncties en computer zijn inbegrepen en welke afspraken voor installatie, training en service beschikbaar zijn.