Gids voor celtelling
Een celteller voor celkweek kiezen
Kies een telmethode voor de suspensie die u werkelijk meet: celgrootte, concentratie, aggregaten, debris en het doel van de telling. Routinematig uitzaaien, levensvatbaarheidsmonitoring en somatische celtelling in melk zijn verschillende workflows. Vergelijk zowel de meting en monstervoorbereiding als het instrument.
Bespreek uw experiment →
Instrumenten vergelijken
Specificaties uit de productdatasheets. Open een instrument voor de volledige uitvoering, beperkingen en download. Op een smal scherm kunt u de tabel horizontaal verschuiven.
| Instrument | Celgrootte | Concentratiebereik | Laadvolume |
|---|---|---|---|
| Automatische helderveldcelteller → | 5–60 µm | 1 × 10⁴ tot 1 × 10⁷ cellen/mL | 20 µL per kamer |
| Automatische celteller met vier kanalen → | 5–60 µm | 1 × 10⁴ tot 2 × 10⁷ cellen/mL | 20 µL/kanaal |
Definieer het monster en de te rapporteren grootheid
Leg celtype, verwachte diameterverdeling en concentratie vast voordat u een preset kiest. Beide automatische celkweektellers hieronder vermelden een celdiameterbereik van 5–60 µm. Dat is een catalogusspecificatie, geen bewijs dat ieder celtype of gemengd monster binnen dat bereik even goed wordt gemeten. Beoordeel de beeldoverlays voor kleine cellen, debris, rakende cellen en aggregaten.
Totale concentratie, concentratie van levensvatbare cellen en percentage levensvatbaarheid zijn verschillende uitkomsten. De vierkanaalsteller vermeldt trypaanblauw of Erythrosine B voor de beoordeling. Controleer kleurstof, mengverhouding en incubatie-/afleestijd voor uw methode. Kleuring van membraanintegriteit meet één aspect van levensvatbaarheid en stelt niet iedere vorm van celfunctie vast.
Gebruik voor melk de aparte fluorescentiegebaseerde somatische telworkflow met de bijbehorende glaasjes en kleuringskit. De monstermatrix en analyse verschillen van routinetellingen in zoogdiercelkweek. Gebruik deze teller niet als vervanging voor een celkweekteller alleen omdat beide cellen per milliliter rapporteren.
Vergelijk werkbereik en geanalyseerd volume
De helderveldteller vermeldt 1 × 10⁴ tot 1 × 10⁷ cellen/mL. De snelle, normale en precieze modi analyseren respectievelijk 0,15, 0,9 en 3,6 µL, met circa 20, 30 en 100 seconden verwerkingstijd per test. Kies de modus op basis van de vereiste meting, niet alleen de kortste verwerkingstijd. Dit zijn verwerkingstijden van het instrument; voorbereiding en resultaatcontrole komen erbij.
Het vierkanaalssysteem vermeldt 1 × 10⁴ tot 2 × 10⁷ cellen/mL, met een aanbevolen bereik van 1 × 10⁵ tot 1 × 10⁷ cellen/mL. Het laadvolume is 20 µL per kanaal en de opgegeven verwerkingstijd circa 15 seconden per kanaal. Vier kanalen betekent maximaal vier monsters op een glaasje; het betekent niet vier fluorescentiekleuren of vier gelijktijdige metingen in 15 seconden.
Laadvolume is niet hetzelfde als geanalyseerd volume. Bij verdunde monsters kunnen minder getelde objecten de schatting gevoeliger maken voor bemonsteringsvariatie. Bij een te hoge concentratie kan verdunning nodig zijn om overlappende objecten te voorkomen. Noteer de verdunningsfactor en controleer of het instrument deze automatisch toepast voordat u het resultaat opnieuw corrigeert.
Evalueer met uw eigen monsters
Begin met representatieve monsters en vooraf vastgelegde acceptatiecriteria. Meng consistent, vul kamers onafhankelijk en herhaal metingen bij de concentraties en levensvatbaarheidsniveaus die voor uw werk relevant zijn. Beoordeel opgeslagen beelden naast de getallen, zodat een verandering in segmentatie niet voor een biologisch verschil wordt aangezien.
Een verdunningsreeks kan proportionaliteit toetsen; onafhankelijk gevulde kamers kunnen herhaalbaarheid toetsen. Overeenstemming met een handmatige telkamer is nuttige context, maar ook die kamer kent bemonsterings- en operatoronzekerheid. Overeenstemming alleen of een hoge correlatie bewijst geen absolute nauwkeurigheid. Leg monstervoorbereiding, kleuring, preset, analysegrenzen en verdunningsberekening bij iedere vergelijking vast.
Voor incidentele tellingen of visuele controles kan een wegwerptelkamer passen, mits microscoop en werkwijze geschikt zijn. Kijk bij routinematige batches naar het aantal monsters dat tegelijk binnenkomt, glaasjescompatibiliteit, voorbereiding, beeldcontrole en export. Controleer levering van verbruiksartikelen en softwarefuncties voordat u alleen op seconden per test selecteert.
Instrumenten voor deze workflow
Controleer de exacte uitvoering en assaycompatibiliteit op de productpagina. Vermelding is geen validatie voor ieder monster.
Bronnen en reikwijdte
De vergelijking gebruikt de specificaties in de gekoppelde productdatasheets. De tekst geeft selectieadvies; er wordt geen prestatievalidatie voor uw monster geclaimd. Voor onderzoeksgebruik.
Methodologische achtergrond voor het evalueren van telmethoden: NIST — precisie en proportionaliteit van celtelling. Deze verwijzing is geen goedkeuring van de aangeboden instrumenten.
Gegevens voor de instrumentkeuze
- Celtype, diameter en verwachte concentratie
- Totale telling, levensvatbare concentratie of levensvatbaarheidspercentage
- Kleurstof, verdunningsmethode en monsters per batch
- Gewenste beeldcontrole, export en passende verbruiksartikelen
Bespreek uw experiment
Geef aan wat u wilt meten. In de volgende stap voegt u uw contactgegevens toe en controleert u de aanvraag vóór verzending.
Selectiehulp en toepassingen
Beeldvormingssystemen vergelijken
Een beeldvormingssysteem voor levende cellen kiezen →
Vergelijk zes beeldvormingssystemen op kweekvaten, objectieven, fluorescentie en incubatorruimte en bepaal de uitvoering voor uw experiment.
Toepassingsvoorbeeld
Wondsluiting volgen met time-lapsebeeldvorming →
Een gedocumenteerde scratch-assay met NIH-3T3-cellen: helderveldbeelden om de 30 minuten gedurende 72 uur, wondoppervlakteanalyse en interpretatiegrenzen.
Toepassingsvoorbeeld
Een cytotoxische respons in de tijd volgen →
Een gedocumenteerd voorbeeld met HeLa-cellen: helderveldconfluentie en groene fluorescentie tijdens een blootstelling van 48 uur aan nocodazol.